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商品介绍：产品编号
 1051 
产品名称
 小鼠转化生长因子-β1(mouse TGF-β1)
 
中文产品名称
 小鼠转化生长因子-β1
 
英文产品名称
 mouse TGF-β1
 
方法
 酶联免疫/酶免法(ELISA)
 
关键词(keyword):mouse TGF-β1 , mouse 转化生长因子-β1 , mouse转化生长因子-β1 , TGF-β1 , 小鼠 TGF-β1 , 小鼠 转化生长因子-β1 , 小鼠TGF-β1 , 小鼠转化生长因子-β1 , 转化生长因子-β1 , 转化生长因子-β1(TGF-β1) 
说明书
 
用途: 
 
临床意义:

转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)是属于一组新近发现的调节细胞生长和分化的TGF-β超家族。这一家族除TGF-β外，还有活化素(activins)、抑制素(inhibins)、缪勒氏管抑制物质(Mullerian inhibitor substance, MIS)和骨形成蛋白(bone　morphogenetic proteins, BMPs)。 TGF-β的命名是根据这种细胞因子能使正常的成纤维细胞的表型发生转化，即在表皮生长因子(EGF)同时存在的条件下， 改变成纤维细胞贴壁生长特性而获得在琼脂中生长的能力，并失去生长中密度依赖的抑制作用。TGF-β与早先报道的从非洲绿猴肾上皮细胞BSC-1所分泌的生长抑制因子是同一物。

1.　TGF-β的产生

(1)机体多种细胞均可分泌非活性状态的TGF-β。在体外， 非活性状态的TGF-β又称为latency associated peptide (LAP)，通过酸处理可被活化。在体内， 酸性环境可存在于骨折附近和正在愈合的伤口。蛋白酶的裂解作用可使TGF-β复合体变为活化TGF-β。一般在细胞分化活跃的组织常含有较高水平的TGF-β，如成骨细胞、肾脏、 骨髓和胎肝的造血细胞。TGF-β1在人血小板和哺乳动物骨中含量最高；TGF-β2在猪血小板和哺乳动物骨中含量最高；TGF-β3以间充质起源的细胞产生为主。

(2)活化后T细胞或B细胞产生TGF-β水平比静止细胞明显为高。

(3)几乎所有肿瘤细胞内均可检测到TGF-β mRNA。神经胶质细胞瘤在体内可分泌较高水平的TGF-β。

2.　TGF-β的分子结构和基因 1985年TGF-β的基因克隆成功，并在大肠杆菌内得到表达。在哺乳动物至少发现有TGF-β1、TGF-β2、TGF-β3、TGF-β1β2四个亚型。 在鸟类和两栖类动物还分别存在着TGF-β4和TGF-β5，对后两者的生物学作用所知甚少。

TGF-β是由两个结构相同或相近的、分子量为12.5kDa亚单位借二硫键连接的双体。人TGF-β cDNA序列研究表明，单体的TGF-β 112氨基酸残基是由含400氨基酸残基的前体分子(per-pro-TGF-β)从羧基端裂解而来。Pre-pro-TGF-β N端含有一个信号肽， 在分泌前被裂解掉，成为非活性状态的多肽链前体(pro-TGF-β)，通过改变离子强度、酸化或蛋白酶水解切除N端部分氨基酸残基，所剩余的羧基端部分形成有活性的TGF-β。TGF-β1与TGF-β2有71％氨基酸同源性，TGF-β1与TGF-β3有77％同源性，TGF-β2与TGF-β3有80％同源性。TGF-β与TGF-β超家族其他成员有30～40％同源性。

人TGF-β1、TGF-β2和TGF-β3的基因分别定位于染色体19ｑ3、1ｑ41和14ｑ24，均含有7个外显子，核苷酸序列有高度同源性，所编码的前体分子C端都有9个保守的Cｙｓ，提示TGF-β1、TGF-β2和TGF-β3基因可能来自一个共同的祖先基因。人和小鼠TGF-β1的同源性高达99％，表明在不同种属中TGF-β都具有重要的生物学功能。对其人TGF-β1基因调控区进行了研究，发现该基因5端序列包含5个明显的调控区:一个类增强子(enhancer-like)活性区，二个负调控区和二个启动子区。

3.　TGF-β受体　 许多细胞表面都有TGF-β受体。大鼠成纤维细胞系NRK-49F和BALB/c 3T3细胞表面TGF-β受体亲和力Kd值为5.6～14×10-11M, 每个细胞TGF-β结合点约1.6～1.9×104。在淋巴细胞表面，TGF-βRKd值1～5.1×10-12M。T细胞、B细胞每个细胞TGF-βR数约250，活化后受体数量可增加5～6倍，但Kd值无明显变化。造血细胞表面TGF-βR对TGF-β1亲和力要比TGF-β2明显为高，这可能解释了造血细胞对TGF-β1反应要比TGF-β2更为敏感。TGF-β1、β2和β3结合细胞表面相同的受体。

最近发现TGF-βR存在着Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型三种形式，分子量分别为53kDa、 70～85kDa和250～350kDa。Ⅰ、Ⅱ型TGF-βR均为糖蛋白， 它们和TGF-β1的亲和力要比和TGF-β2的亲和力大10～80倍；Ⅲ型受体是一种蛋白聚糖(proteoglycan)，它与TGF-β1、TGF-β2、TGF-β3的亲和力近似，是为TGF-β主要的受体，可能在TGF-β发挥生物学功能中起着主要作用。TGF-βRⅢ又名Endoglin, CD105, TGF-β1和TGF-β3为其主要配体。

Ⅱ型TGF-βR胞浆区具有丝氨酸/苏氨酸激酶区。这种结构也见于活化受体Ⅱ( ActRⅡ)和ActRⅡB。Ⅲ型TGF-β受体本身缺乏蛋白激酶活性，对于其如何参与信号的传递还不清楚。当TGF-β诱导增殖时G蛋白可能参与诱导过程，此外，TGF-β促进Ca2+内流和胞内IP3水平的升高，激活PKC。

4.　TGF-β的生物学作用 起初对TGF-β的生物学功能研究主要在炎症、组织修复和胚胎发育等方面，近年来发现TGF-β对细胞的生长、分化和免疫功能都有重要的调节作用。TGF-β1、β2和β3功能相似，一般来说，TGF-β对间充质起源的细胞起刺激作用，而对上皮或神经外胚层来源的细胞起抑制作用。

(1)抑制免疫活性细胞的增殖: ①抑制IL-3、GM-CSF、M-CSF所诱导小鼠造血前体细胞和LTBMC的集落形成，并降低巨核细胞对IL-3和CSF的反应性。②抑制ConA诱导或ConA与IL-2、IL-6联合诱导的胸腺细胞增殖。③抑制丝裂原、 同种异体抗原刺激的T细胞增殖或IL-2依赖的T细胞生长。④抑制SAC刺激后IL-2依赖的B细胞增殖。

(2)对细胞表型的调节: ①抑制IL-2诱导的T细胞IL-2R、TfR和TLiSA1活化抗原的表达，对CD3表达未见有影响。②抑制IFN-γ诱导黑素瘤细胞MHCⅡ类抗原表达。

(3)抑制淋巴细胞的分化: ①抑制IL-2和BCDF依赖的B细胞分泌IgG和IgM， 促进B细胞分泌Ig类型转换为IgA和IgE。②抑制混合淋巴细胞培养(MLC)中CTL、NK和LAK功能， 这种抑制作用可被TNF-α(小鼠MLC)或IL-2(人MLC)所逆转。③抑制PBMC中NK活性以及NK细胞对IFN-α的反应性。④抑制ConA和IL-2、IL-6协同诱导小鼠胸腺MHC非限制杀伤性细胞的活性。

(4)抑制细胞因子产生: 如抑制PBMC中IFN-γ和TNF-α的产生。

(5)其它调节作用: ①促进成纤维细胞、成骨细胞和雪旺氏细胞的生长。TGF-β1、TGF-β2促进人成纤维细胞IL-6的产生，其机理可能是通过对IL-6基因转录的调节。② 抑制上皮细胞、破骨细胞、内皮细胞生长和脂肪、心肌、骨骼肌的形成。 TGF-β可拮抗EGF的某些生物学功能。③促进细胞外基质(ECM)如胶原蛋白、纤粘连蛋白的表达和抑制ECM的降解，对细胞的形态发生、增殖和分化过程起着重要作用，有利于胚胎发育和细胞修复。动物体内实验表明，局部注射TGF-β可以促进伤口愈合和典型肉芽组织形成。④单核细胞和成纤维细胞的趋化剂，但不引起脱颗粒和氧化物的产生。⑤抑制淋巴细胞与内皮细胞的粘附。⑥促进嗜碱性粒细胞释放组织胺。

(6)TGF-β1与原癌基因表达: TGF-β1能诱导c-sis的表达，但抑制c-myc的表达， 这种诱导或抑制作用与作用细胞种类及TGF-β的不同功能有关。如TGF-β诱导成纤维细胞中c-sis基因表达，与促进其在软琼脂中生长有关； 而对上皮角朊细胞生长的抑制则与抑制c-myc基因表达有关。TGF-β1、TGF-β2和TGF-β3在大多数生物学作用方面非常相似，但在有些作用方面可有很大差异，如TGF-β2对血管内皮细胞和造血祖细胞的生长抑制作用仅为TGF-β1和TGF-β3的1%。

TGF-β在治疗伤口愈合，促进软骨和骨修复以及通过免疫抑制治疗自身免疫性疾病和移植排斥等方面有潜在的应用前景。

［α2-巨球蛋白的细胞因子载体效应］ α2-巨球蛋白(α2M)是由4个相同多肽亚单位靠链间二硫键和非共价键结合形成具有交叉结构的四聚体。每个亚单位内由半胱氨酸的巯基与邻近的谷氨酰胺残基的羧基形成硫酯键。这种硫酯键易受蛋白水解酶裂解从而使α2M构型变化增加其电泳迁移率，称为快型α2M(Fα2M)。硫酯键裂解可与含有巯基的细胞因子结合成复合物，出现细胞因子载体效应。

(1)IL-1β:IL-1β与人α２M结合的最佳条件为pH9.0～9.3，这种结合是可逆的，与α２M结合的IL-1β呈“隐蔽”状态，如果IL-1β从复合物中释放出来，仍恢复自然的IL-1β活性。

(2)IL-6:α２M与IL-6结合可保护IL-6，不易被胰蛋白酶、糜蛋白酶以及组织蛋白酶G的作用，从而延长血浆中IL-6的半衰期。呈结合状态的IL-6并不改变其生物学活性。

(3)TGF-β:α２M可降低血浆中TGF-β的生物学活性，其机理除抑制TGF-β与其相应受体结合外，α２M与TGF-β复合物可能被具有α2M受体的吞噬细胞所清除。

(4)其它:α2M还可作为巨噬细胞活化因子(MAF)、血小板衍生的生长因子(PDGF)、碱性成纤维细胞生长因子(ｂFGF)的载体，对它们的生物学活性产生不同的影响。

胎牛血清中含有较高水平的α2M， 因此体外培养测定条件培养液中某些细胞因子时应加注意。

表4-10 　α2M对所结合细胞因子活性的影响 所结合的细胞因子
 细胞因子活性变化
 影响机理
 
IL-1β
 部分降低
 使IL-1β活性部位呈隐蔽状态
 
IL-6
 不变
 抑制多种酶裂解IL-6,从而延长IL-6在血浆中的半衰期
 
TGF-β
 降低
 抑制TGF-β与相应受体结合，加速TGF-β的清除
 
MAF
 不变
 保护作用
 
PDGF
 降低
 加快PDGF的清除
 
BFGF
 失活
 促进ｂ-FGF的酶解，加速从血循环中排出
 

 
检测原理:
 
特异性(SPECIFICITY):
 
试剂盒组成(KIT CONTENT):
 
保存:贮藏于2-8℃.
 
样品类型(SAMPLE TYPES): 
 
样品采集: 
 
警告及注意事项:
  2.如果可能传播疾病,所有的样品都应管理好,按照规定的程序处理样品和检测装置.
 
准备工作:
 
操作步骤:
 
结果判断: 
举例: 
灵敏度(SENSITIVITY):  
检测范围(RANGE):  
参考值:  
交叉反应(CROSS REACTION):