货号 名称 提取的培养物体积 DNA 产量 反应次数 价格
PLN10 GenEluteTM Plasmid 10 230
PLN70 1-5 ml 3-20 ug 70 500
PLN350 Miniprep 350 2350
PLD35 GenEluteTM Plasmid 5-40 ml 35 2860
PLD140 Midiprep 25-250 ug 140 8855
PLX15 GenEluteTM Plasmid 25-130 ml 200-1200 15 2258
PLX50 Maxiprep ug 50 6455
2、无内毒素的质粒提取试剂盒(GenEluteTM Endotoxin-free Plasmid Kits)
提取质粒的时候通常一起得到了内毒素,而内毒素会降低敏感细胞的转染效率。收集培养的大肠杆菌,用碱性SDS 裂解得到澄清的裂解液,通过提取步骤从裂解液中
除掉内毒素。DNA 在高盐的条件下结合到硅上。洗涤后,DNA 溶于无内毒素的水或缓冲液。PLED35 可以提取250ug 质粒,PLEX15 可以提取1.2mg 质粒。提取的DNA 主要是超螺旋状态,不含有基因组DNA 和RNA 。DNA 可以用于转染、限制性酶切、克隆、测序和PCR 扩增等等。
优点:1)提取产品具有更高的转染效率。2)比离子交换柱或磁珠柱纯化更快。3)不需要昂贵的磁性装置。
货号 名称 提取的培养物体积 DNA 产量 反应次数 价格
PLED35 GenEluteTM Endotoxin-free Plasmid Midiprep Kit 5-40 ml 250 ug 35 2630
PLEX15 GenEluteTM Endotoxin-free Plasmid Maxiprep Kit 25-130 ml 1200 ug 15 2630
3、高效质粒提取试剂盒(GenEluteTM High Performance Plasmid Kits)
在30 分钟内纯化DNA ,用抽真空或离心的方式都可以纯化DNA 。离心收集培养的大肠杆菌,用碱性SDS 裂解,裂解物通过注射过滤器后DNA 结合到硅质膜上。洗涤除掉膜中的杂质,结合的DNA 溶于水或缓冲液。提取的DNA 可以用于转染、限制性酶切、连接以及自动测序等等。
优点:1)30 分钟以内可以完成从收集细菌到得到纯化的DNA。2)每次能够提取250ug(Midi)和1.2mg
(Maxi)质粒。3)可以任意采取真空或者离心方法。4)与其它快速提取方法相比,该试剂盒
含的塑料很少,减少了环境污染。5)不需要苯酚/氯仿提取或者乙醇沉淀。6)该试剂盒在室温下稳定,方便储存。
货号 名称 反应次数 价格
NA0200S GenEluteTM HP Plasmid Midiprep kit 4 431
NA0200 25 2731
NA0300S 4 935
NA0300 GenEluteTM HP Plasmid Maxiprep kit 10 2300
NA0310 25 5535
4、大分子量质粒提取试剂盒(PhasePrep BAC DNA Kit)
该试剂盒利用相分离方法,可以快速、有效的提取大分子量质粒,如从重组大肠杆菌中提取人工细菌染色体(BACs)。该试剂盒可用于微量、小量、中量或大量纯化,其中的试剂可以用于300 次微量纯化、180 次小量纯化、30 次中量纯化或15 次大量纯化。从5、40、250 或者500 ml 过夜培养的大肠杆菌中分别可以纯化2、12、60 或者100 µg 的BAC DNA 。纯化的BAC DNA 含内毒素的量非常低,可以用于自动测序、PCR 、限制性酶切、克隆或者其它应用。
优点:1)5-500 ml 的过夜培养物能够提取2-100 ug 的DNA。2)不需要苯酚/氯仿提取步骤。3)同一试剂盒可以用于微量或者大量纯化。4)提取迅速。
产品号 名称 提取的培养物体积 DNA 产量 价格
NA0100 PhasePrep BAC DNA Kit 5 - 500 ml 2 - 100 µg 3766
二、基因组DNA 提取试剂盒1、哺乳动物基因组DNA 提取试剂盒(GenEluteTM Mammalian Genomic DNA Miniprep Kits)
GenEluteTM 哺乳动物基因组DNA 提取试剂盒能够简单方便的从多种哺乳动物来源的细胞组织中分离纯的、高分子量DNA。
哺乳动物的细胞和组织用缓冲液裂解,大分子变性,DNA 结合到离心柱的膜上,通过离心除掉其它裂解物。DNA 溶于缓冲液后,可以用于测序、克隆、杂交、限制性酶切、连接以及PCR 等等。
优点:
1)2×106 细胞可以提取20ug DNA,25mg 组织可以提取30ug DNA 。
2)在裂解后20 分钟以内完成DNA 的提取。
3)获得的基因组DNA 的A260/A280 比率
介于1.6 和1.9 之间。4)可以纯化大分子量基因组DNA(50-150Kb)。
货号 名称 反应次数 价格
G1N10 GenEluteTM Mammalian Genomic DNA 10 259
G1N70 70 1595
G1N350 Miniprep 350 6828
2、全血基因组DNA 提取试剂盒(GenEluteTM Blood Genomic DNA Kits)
利用该试剂盒可以从简单、方便地从新鲜和储存的全血中提取高质量的基因组DNA,不需要昂贵的树脂和有毒的有机化合物,提取的DNA 可以用于限制性酶切、杂交、测序以及PCR 等。
优点:1)可以从新鲜和储存的血液中提取DNA。2)在40 分钟内可以完成提取过程。3)获得的基因组DNA 的A260/A280
比率介于1.6 和1.9 之间。
货号 名称 反应次数 价格
NA2000 10 230
NA2010 GenElute TM Blood Genomic DNA kit 70 1351
NA2020 350 5765
3、植物基因组DNA 提取试剂盒(GenEluteTM Plant Genomic DNA Miniprep Kits)
该试剂盒能够从多种植物中提取基因组DNA。每次可以从100mg 新鲜的或者20mg 冻干的植物组织中提取DNA。植物组织在液氮中研磨碎后,通过裂解、沉淀和离心后得到裂解液。通过硅结合和洗涤过程得到基因组DNA。纯化的DNA 可以用于PCR 、限制性酶切、克隆和杂交等等。
优点:1)整个纯化过程不超过40 分钟。2)每次可以纯化得到20ug 的DNA。3)不需要RNA 酶处理。
货号 名称 反应次数 价格
G2N10 GenElute TM Plant Genomic DNA 10 330
G2N70 70 2113
G2N350 Miniprep 350 9128
4、细菌基因组DNA 提取试剂盒(GenEluteTM Bacterial Genomic DNA Kit)
该试剂盒可以从培养的多种细菌中提取基因组DNA,包括革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌。
首先用酶孵育以裂解细菌、释放DNA 。DNA 结合到硅质膜上,通过离心除掉其它物质。洗涤后,DNA 溶于缓冲液中。纯化的DNA 长度可达50kb ,可用于限制性酶切、PCR 和杂交等等。
如果利用该试剂盒提取革兰氏阳性菌DNA 必须另外购买配套试剂溶菌酶(L7651)以彻底裂解细胞壁。
优点:1)提取时间不超过2 小时2)纯化的DNA A260/A280 比率介于1.6 和1.9 之间。3)通常能够提取15ug 到20ug 的DNA。
货号 名称 反应次数 价格
NA2100 10 245
NA2110 GenElute TM Bacterial Genomic DNA Kit 70 1453
NA2120 350 6268
三、直接PCR 试剂盒1、组织细胞直接PCR 试剂盒(Extract-N-Amp TM Tissue PCR Kit)
Extract-N-Amp TM Tissue PCR Kit
该产品可以快速从多种组织细胞中提取DNA,如鼠尾、头发、动物组织、唾液以及口腔刮取细胞等。
采用了新的提取方法,不需要长期酶解或匀浆。
通过热启动PCR 直接从基因组DNA扩增目的片段。不需要分别提取DNA 和PCR 扩增,节省了大量的时间。
优点:1)快速:在15分钟内完成基因组的提取并开始PCR 。2)方便:不需要长时间的酶解或匀浆。3)实用:快速进行基因鉴定。4)应用范围广:鼠尾、头发、动物组织、唾液等。5)特异性:热启动酶提高了PCR 的特异性。
货号 名称 反应次数 价格
XNAT2 XNAT2R Extract-N-Amp TM Tissue PCR Kit 100 1000 2273 20988
REDExtract-N-Amp TM Tissue PCR Kit
与Extract-N-Amp TM Tissue PCR Kit 相比,该产品含有惰性染料作为示踪,可以直接在琼脂糖凝胶上样。
货号 名称 反应次数 价格
XNATS 10 294
XNAT REDExtract-N-Amp TM Tissue PCR Kit 100 2346
XNATR 1000 21706
2、全血直接PCR 试剂盒(Extract-N-AmpTM Blood PCR kits)
利用该试剂盒可以在8 分钟内开始从全血进行基因组DNA 的PCR 。该方法不需要任何纯化、离心、加热、过滤或者酒精沉淀过程。该试剂盒也可以对提
取的基因组DNA 进行PCR 扩增。REDExtract-N-AmpTM Blood PCR kits 含有染料,可以直接在电泳胶上样。10ul 全血加入提取液室温孵育5 分钟,然后加入中和液。取部分提取物开始PCR 。
优点:1)只需8 分钟就可以通过基因组DNA 提取开始PCR 。2)不需要任何纯化、离心、加热、过滤或者酒精沉淀过程。3)只有3 个步骤,不需要任何特别的装置。4)含有基因组DNA 进行PCR 扩增的高度特异性热启动抗体。5)可以用于全血或者血卡。6)提取物在4 度可以保存6 周。
货号 名称 提取次数 扩增次数 价格
XNAB2 100 100 2178
XNAB2E Extract-N-AmpTM Blood PCR kits 100 500 9438
XNAB2R 1000 1000 20556
XNAB2RE 1000 5000 83231
XNAB 100 100 2240
XNABE REDExtract-N-AmpTM Blood PCR kits 100 500 9800
XNABR 1000 1000 20844
XNABRE 1000 5000 86825
3、植物直接PCR 试剂盒(Extract-N-AmpTM Plant PCR kits)
利用该试剂盒可以在15 分钟内开始从叶子进行基因组DNA 的PCR 。该方法不需要用液氮对植物组织进行冰冻、机械处理、纯化或者DNA 的沉淀。该试剂盒也可以对提取的基因组DNA 进行PCR 扩增。REDExtract-N-AmpTM Plant PCR kits 含有染料,可以直接在电泳胶上样。
0.5 到0.7cm 的植物叶片与提取液在95 度孵育10 分钟提取基因组DNA。加入同样体积的稀释液中和。然后可以取部分提取物进行PCR 扩增。
优点:1)在15 分钟内可以一步提取植物基因组DNA。2)不需要液氮对植物组织进行冰冻、机械处理、
纯化或者DNA 的沉淀。3)含有基因组DNA 进行PCR 扩增高度特异性的
热启动抗体。4)REDExtract-N-AmpTM 不需要上样缓冲液和染料。5)提取物在4 度可以保存6 周。
货号 名称 提取次数 扩增次数 价格
XNAP2 100 100 2185
XNAP2E Extract-N-AmpTM Plant PCR kits 100 500 9800
XNAPR 1000 1000 19550
XNAP2RE 1000 5000 79062
XNAP 100 100 2179
XNAPE REDExtract-N-AmpTM Plant PCR kits 100 500 10113
XNAPRE 1000 5000 83088
4、种子直接PCR 试剂盒(Extract-N-Amp™Seed PCR Kits)利用该试剂盒可以在15 分钟内开始从种子进行基因组DNA 的PCR 。该方法不需要长时间酶解。该试剂盒也可以对提取的基因组DNA 进行PCR 扩增。REDExtract-N-AmpTM Plant PCR kits 含有染料,可以直接在电泳胶上样。植物种子首先与提取液孵育,然后加入中和液。可以取部分提取物进行PCR 扩增。
优点:1)15 分钟内可以一步提取植物基因组DNA 。2)不需要长时间酶解。3)含有基因组DNA 进行PCR 扩增高度特异性的
热启动抗体。4)REDExtract-N-AmpTM 不需要上样缓冲液和染料。
货号 名称 提取次数 扩增次数 价格
XNASS 10 10 288
XNAS2 Extract-N-Amp™Seed PCR Kits 100 100 2228
XNAS 100 100 2300
四、反应后的DNA 纯化试剂盒1、PCR 产物回收试剂盒(GenEluteTM PCR Clean-Up Kit)
该试剂盒可以快速纯化单链和双链PCR 产物(100 bp-10 kb),去除其中的引物、核苷酸、DNA 聚合酶。
DNA 结合到硅质膜上,结合的DNA 经过洗涤,溶于缓冲液中,每次可以纯化100 ul 的PCR 产物。100 bp-10 kb 的PCR 产物回收率达到95%,99% 以上的引物和引物聚合体被除掉。
纯化的DNA 可以用于酶反应、传统和自动测序、克隆以及微阵列分析。
优点:1)在8 分钟内可以纯化100 ul 或者10 ug 的PCR 扩增DNA。2)100bp 到10kb 长度之间的PCR 产物回收率达95% 。3)引物和其它成分的去除率达99% 。4)不需要从有机提取物中去除矿物油。
货号 名称 反应次数 价格
NA1020 GenEluteTM PCR Clean-Up Kit 70 1135
2、琼脂糖DNA 回收试剂盒(GenEluteTM Agarose Spin Columns)
该试剂盒通过离心/过滤从琼脂糖凝胶中简单快速的纯化DNA。
将含目的DNA 的琼脂糖凝胶置于离心柱中,在微离心机中以最高速度离心,含DNA 的溶液收集到离心管中。
优点:1)只需一步,在10 分钟内纯化DNA。2)不需要融化或降解凝胶。3)不需要乙醇沉淀。
货号 名称 反应次数 价格
5-6500 GenEluteTM Agarose Spin Columns 70 780
3、无EB 的DNA 回收试剂盒(GenEluteTM Minus EtBr Spin Columns)
可以从含EB 的凝胶或者溶液中回收DNA 。
该试剂盒基于GenEluteTM Agarose Spin Columns,加入了选择性去除EB 的膜。将含目的DNA 的琼脂糖凝胶置于离心柱中,其中的膜阻止了琼脂糖和EB 通过,而DNA 则收集到离心管中。
通过10 分钟的纯化过程可以除掉95% 的EB。
纯化的DNA 不需要经乙醇沉淀可以直接用于连接、限制性酶切、克隆、PCR 以及相关处理。
货号 名称 反应次数 价格
5-6501 GenEluteTM Minus EtBr Spin Columns 70 1223
4、反应后纯化柱(SigmaSpin™Post-Reaction Clean-Up Columns)
该纯化柱可以方便的清除测序反应中未整合的染料、核苷酸和盐。也可以用于PCR 后去除盐和引物。
该纯化柱在室温可以储存1 个月,在2-8 度可以储存1 年。
货号 名称 反应次数 价格
S5059 SigmaSpin™Post-Reaction Clean-Up Column 70 1078
5、反应后96 孔纯化板(SigmaSpin™ 96-Well Post-Reaction Clean-Up Plates)
该纯化柱可以快速、简单、高效的清除测序反应中未整合的染料、核苷酸和盐。也可以用于PCR 后去除盐和引物。
该纯化柱在室温可以储存1 个月,在2-8 度可以储存1 年。
货号 名称 反应次数 价格
S4309 SigmaSpin™ 2 Post-Reaction Clean-Up Plates 2 2346
S4434 SigmaSpin™ 10 Post-Reaction Clean-Up Plates 10 10163
S4559 SigmaSpin™ 50 Post-Reaction Clean-Up Plates 25 18256
6、DNA 沉淀试剂(线性聚丙烯酰胺,LPA)
该试剂是乙醇沉淀皮克级DNA 的有效中性载体。在下游应用方面,GenElute™LPA 与其它载体如tRNA 和糖原相比有多项优势。例如,在DNA 磷酸化过程中tRNA 与核酸激酶相互作用,在DNA-蛋白质相互作用研究中糖原与蛋白质竞争。相比之下,LPA 是惰性的,不影响核酸的下游研究。
在乙醇沉淀DNA 的时候加入LPA 可以完全回收20bp 以上的核酸。在加入乙醇后,LPA/ 核酸的共沉淀物很快就可以用肉眼看到而不需要低温孵育。回收的DNA 马上可以用于下游操作如限制性酶切、连接、测序和PCR 等。
该试剂不含核酸酶和RNA 酶。该试剂仅为实验室用,不能用于药品、家庭或者其它用途。储存于2-8 度,不能冰冻。
需要准备的试剂:1)3M 醋酸钠缓冲液,pH 5.2,SIGMA 产品号S7899 。2)无水乙醇,SIGMA 产品号E7023 。3)1×TE 缓冲液,SIGMA 100×TE 缓冲液产品号T9285 ,或者分子生物学用水W4502 。
货号 名称 规格 价格
5-6575 GenElute™-LPA 1ml 1016
五、RNA 提取试剂盒1、总RNA 提取试剂(TRI Reagent,RNA Isolation Reagent)
TRI ® Reagent 是改进型的一步法细胞总RNA 纯化试剂。它可以快速、经济、有效的提取人、动物、植物、酵母、细菌和病毒的总RNA 。也可以同时提取DNA 和蛋白质。该产品含有硫氰酸胍和苯酚,能够有效溶解RNA,DNA 和蛋白质。在加入氯仿并离心后,上层水相中含有RNA 。
水相的RNA 经过沉淀和洗涤后几乎没有DNA 或者蛋白质污染,可以用于Northern blots 、mRNA 纯化、体外翻译、RNA 酶保护分析、克隆或者PCR 等等。该产品可以有效分离0.1-15 kb 长度单位内的RNA 分子,每毫升TRI® Reagent 可以提取5-10×106 细胞、50-100 mg 组织或者10 cm2 培养瓶表面的单层培养细胞。
完全移走水相的离心产物加入无水乙醇沉淀DNA,用柠檬酸钠乙醇溶液洗涤,溶解后可用于PCR 、限制性酶切以及Southern blotting 等。沉淀DNA 后的水相加入异丙醇沉淀蛋白质,用盐酸胍乙醇溶液洗涤,分离的蛋白质可用于Western blotting 等。
优点:1)可用于多种组织:人、动物、植物、酵母、细菌和病毒。2)提取大量或者少量的组织细胞效果良好。3)比传统的硫氰酸胍/氯化铯方法产率高。4)1 ml 最多可以提取107 细胞或者100 mg 组织。
货号 名称 适用范围 产品规格 价格
T9424 TRI Reagent 组织,培养细胞,细胞团 25ml, 100 ml, 200 ml 506,1590,2860
T3809 TRI Reagent BD 全血,血浆,血清 25ml, 100 ml, 200 ml 536,1699,2978
T3934 TRI Reagent LS 细胞悬浮液,脑脊液,羊水 25ml, 100 ml, 200 ml 938,2603,4336
2、哺乳动物细胞总RNA 提取试剂盒(GenEluteTM Mammalian Total RNA Miniprep Kits)
该试剂盒结合了硅质膜技术和离心柱技术,可以快速结合、洗涤、溶解获得高质量的细
胞总RNA 。
样品用含硫氰酸胍和2-巯基乙醇的裂解液裂解以释放RNA 并灭活RNA 酶,离心去除
细胞碎片和DNA。得到的液体经过硅柱以结合RNA ,洗涤后溶解RNA 。
每次纯化可以得到150ug 的RNA 。提取的RNA 可以用于杂交,RT-PCR ,以及其它用
途。
优点:1)每次可以提取107 个细胞或者40mg 的组织。2)每次纯化可以获得150ug 的总RNA 。3)可以从少至100 个细胞提取总RNA 。4)比阴离子交换方法快。5)不需要异丙醇沉淀和乙醇洗涤。
货号 名称 反应次数 价格
RTN10 10 418
RTN70 GenEluteTM Mammalian Total RNA Miniprep Kit 70 2818
RTN350 350 12420
3、哺乳动物细胞mRNA 提取试剂盒(GenEluteTM mRNA Miniprep Kits)
该试剂盒可以方便的从哺乳动物细胞、组织或者已经制备的总RNA 中提取带有PolyA 尾巴的RNA 。
细胞或组织用SDS/ 蛋白酶K 处理以释放RNA 并除掉RNA 酶。试剂盒中连接于1um 聚苯乙烯珠上的PolyT 通过杂交与带有PolyA 尾巴的RNA 结合。聚苯乙烯珠在杂交时保持悬浮状态,不需要搅拌,但是纤维素和磁珠需要混合搅拌才能保持悬浮。另外聚苯乙烯珠与纤维素珠相比只需很少的洗涤步骤就可以获得更纯净的mRNA 。
制备的mRNA 可以用于Northern Blotting 、芯片杂交、cDNA 合成以及构建文库。
优点:1)mRNA 与聚苯乙烯珠结合只需10 分钟,不需要混合搅拌。2)从总RNA 中分离带有PolyA 尾巴的RNA 不超过40 分钟,从细胞或组织分离不超过60
分钟。3)聚苯乙烯珠只需较少的洗涤步骤。
货号 名称 反应次数 价格
MRN10 GenEluteTM mRNA Miniprep Kit 10 1150
MRN70 70 6900
DMN10 GenEluteTM Direct mRNA Miniprep 10 1179
DMN70 Kit 70 7203
4、RNAlaterTM 储存液(RNAlaterTM Storage Solution)
该试剂是一种无毒的组织和细胞储存液,可以在不冰冻的状态下稳定并保护细胞内的RNA 。储存在RNAlater 的组织和细胞不需要马上处理或者冰冻在液氮中。该试剂储存的样品可以用于mRNA 和总RNA 的纯化、组织学和免疫组化,可以用于Sigma 的GenElute 纯化试剂盒。
将组织切割至0.5cm 以下,储存在5 倍体积的RNAlater 中。小的组织,如小鼠的肾、肝和脾可以整体保存。在纯化组织RNA 时,取出组织按照纯化试剂的要求纯化RNA 。细胞在储存前用少量的PBS 重悬,加入5-10 倍体积的RNAlater 储存。在提取RNA 前离心细胞,去除液体。
优点:1)迅速渗透组织、灭活RNA 酶,稳定和保护RNA 。2)样品在室温可以保存1 周,在4 度或-20 度可以保存1 个月。3)对其后的mRNA 或总RNA 的纯化没有影响。4)液体无毒,方便下游的处理。
货号 名称 产品规格 价格
R0901 RNAlaterTM Tissue Storage and RNA Stabilization Solution 5ml, 100ml, 500ml 151,1083,3456