大鼠结缔 组织生长因子(CTGF)ELISA试剂盒说明书
小鼠丙二醛(MDA)ELISA 试剂盒说明书
人髓鞘碱性蛋白抗体(MBP-ab)ELISA试剂盒说明书
小鼠过氧化脂质/乳过氧化物酶(LPO)ELISA试剂盒说明书
大鼠皮质醇(Cortisol)酶联免疫诊断试剂盒
小鼠白细胞介素33(IL-33)ELISA试剂盒说明书
人转化生长因子受体β1(TGFR-β1)ELISA试剂盒说明书
小鼠基质金属蛋白酶-9(MMP-9)ELISA试剂盒说明书
人抗精子抗体(AsAb)ELISA试剂盒说明书
人副流感病毒(HPIV)ELISA试剂盒说明书
人溶菌酶(LYS)ELISA试剂盒说明书
大鼠细胞间粘附分子1(ICAM-1)ELISA试剂盒说明书
大鼠肿瘤坏死因子α(TNF-α)ELISA试剂盒说明书
小鼠髓鞘碱性蛋白(MBP)ELISA试剂盒说明书
人胃泌素(Gas)ELISA试剂盒说明书
人胃泌素释放肽(GRP)ELISA试剂盒说明书
小鼠结缔组织生长因子(CTGF)ELISA试剂盒说明书
小鼠结缔组织 生长因子(CTGF)ELISA试剂盒说明书
人血管内皮细胞 生长因子A(VEGF-A)ELISA试剂盒说明书
大鼠磷脂酶 A2(PLA2)ELISA试剂盒说明书
小鼠乳酸脱氢酶(LDH)酶联免疫分析试剂盒
大鼠催乳素(PRL)酶联免疫分析试剂盒
大鼠睾酮(T)ELISA试剂盒说明书
小鼠羟脯氨酸(Hyp)ELISA试剂盒说明书
大鼠胃泌素(Gas)ELISA试剂盒说明书
小鼠白细胞介素1(IL-1)ELISA试剂盒说明书
大鼠血栓素B2( TXB2)ELISA试剂盒说明书
小鼠白细胞介素8(IL-8)ELISA试剂盒使用说明书
小鼠白细胞介素-2(IL-2)ELISA试剂盒使用说明书
猪胰岛素(Insulin)ELISA试剂盒使用说明书
猪孕酮(PROG)ELISA试剂盒使用说明书
小鼠肿瘤坏死因子α(TNF-α)ELISA试剂盒使用说明书
人金黄色葡萄球菌蛋白A(SPA)ELISA试剂盒使用说明书
大鼠8羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)ELISA试剂盒使用说明书
人抗酿酒酵母抗体(ASCA)ELISA试剂盒使用说明书
人嗜酸性粒细胞趋化因子(Eotaxin)ELISA试剂盒使用说明书
人胃蛋白酶原Ⅰ(PGⅠ)ELISA试剂盒使用说明书
猪传染性胃炎抗体(PEDV-Ab)ELISA试剂盒使用说明书
兔纤溶酶原激活物抑制物(PAI-1)ELISA试剂盒说明书
人分泌型磷脂酶A2(sPLA2)ELISA试剂盒说明书
人髓磷脂碱性蛋白(MBP)ELISA试剂盒说明书
植物生长激素(ＩＡＡ)ELISA试剂盒说明书
人β淀粉样蛋白1-40(Aβ1-40)ELISA试剂盒说明书
大鼠端粒酶(TE)ELISA试剂盒说明书
大鼠网膜素(omentin)ELISA试剂盒说明书
大鼠生长激素(GH)ELISA试剂盒说明书
人糖连抗原153(CA153)ELISA试剂盒说明书
人神经特异性烯醇化酶(NSE)ELISA试剂盒说明书
大鼠组蛋白乙酰转移酶(HAT)ELISA试剂盒使用说明书
人环氧合酶-2(COX-2)ELISA试剂盒使用说明书
大鼠皮质酮(CS)ELISA试剂盒使用说明书
人免疫球蛋白M(IgM)ELISA试剂盒使用说明书
小鼠皮质酮(CS)ELISA试剂盒使用说明书
人单纯疱疹病毒(HSV)ELISA试剂盒说明书
大鼠脂肪型脂肪酸结合蛋白(FABP)ELISA试剂盒
人8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)ELISA试剂盒
植物赤霉素(GA)ELISA试剂盒
小鼠8羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)ELISA试剂盒
大鼠卵清蛋白特异性IgE(OVA sIgE)ELISA试剂盒说明书
大鼠环磷酸腺苷(cAMP)ELISA试剂盒使用说明书
人肺表面活性物质相关蛋白A(SP-A)ELISA试剂盒说明书
人中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)ELISA试剂盒
人乳铁蛋白(LF)ELISA试剂盒说明书
人氧化型谷胱甘肽(GSSG)ELISA试剂盒说明书
大鼠热休克蛋白47(HSP47)ELISA试剂盒说明书
大鼠表皮生长因子受体2(Her2)ELISA试剂盒说明书
小鼠C肽(C-Peptide)ELISA试剂盒说明书
人胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)ELISA试剂盒说明书
人β淀粉样蛋白1-42(Aβ1-42)ELISA试剂盒说明书
人游离血红蛋白(f-Hb)ELISA试剂盒说明书
人8异前列腺素(8-iso-PG)ELISA试剂盒说明书
人白介素26(IL-26)ELISA试剂盒说明书
大鼠内脂素(visfatin)ELISA试剂盒说明书
小鼠八聚体结合转录因子4(OCT4)ELISA试剂盒使用说明书
小鼠尿微量白蛋白(ALB)ELISA试剂盒使用说明书
小鼠纤维蛋白肽B(FPB)ELISA试剂盒使用说明书
小鼠诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)ELISA试剂盒使用说明书
人巨噬细胞移动抑制因子(MIF)ELISA试剂盒使用说明书
人神经肽Y(NP-Y)ELISA试剂盒使用说明书
小鼠γ干扰素(IFN-γ)ELISA试剂盒使用说明书
大鼠神经肽Y(NP-Y)ELISA试剂盒使用说明书
鸡白介素6(IL-6)ELISA试剂盒使用说明书
兔神经生长因子(NGF)ELISA试剂盒使用说明书
大鼠胎盘生长因子(PLGF)ELISA试剂盒使用说明书
小鼠神经生长因子(NGF)ELISA试剂盒使用说明书
人尿激酶型纤溶酶原激活物受体(PLAUR/uPAR)ELISA试剂盒说明书
人层连蛋白/板层素(LN)ELISA试剂盒使用说明书
猪白介素6(IL-6)ELISA试剂盒使用说明书
人白细胞介素23(IL-23)ELISA试剂盒使用说明书
人β-神经生长因子(β-NGF)ELISA试剂盒使用说明书
豚鼠γ干扰素(IFN-γ)ELISA试剂盒使用说明书
豚鼠基质金属蛋白酶9(MMP-9)ELISA试剂盒使用说明书
小鼠核因子κB(NF-κB)ELISA试剂盒使用说明书
绵羊瘦素(leptin)ELISA试剂盒使用说明书
鸡白细胞介素-6(IL-6)ELISA试剂盒使用说明书
大鼠角化细胞生长因子(KGF)ELISA试剂盒使用说明书
人神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)ELISA试剂盒使用说明书
鸡促卵泡素(FSH)ELISA试剂盒使用说明书
人胆固醇酯转运蛋白(CETP)ELISA试剂盒使用说明书
猪补体3(C3)ELISA试剂盒使用说明书
大鼠C型钠尿肽(CNP)ELISA试剂盒使用说明书
大鼠雌激素(E)ELISA试剂盒使用说明书
鸡肿瘤坏死因子α(TNF-α)ELISA试剂盒使用说明书
绵羊白介素6(IL-6)ELISA试剂盒使用说明书
人儿茶酚胺(CA)ELISA试剂盒使用说明书
人醛固酮(ALD)ELISA试剂盒使用说明书
鸡α干扰素(IFN-α)ELISA试剂盒使用说明书
人胰淀素(Amylin)ELISA试剂盒使用说明书
猪口蹄疫病毒(FMDV)ELISA试剂盒使用说明书
大鼠a-肾上腺素能受体(a-AR)ELISA试剂盒使用说明书
人胰岛细胞抗体(ICA)ELISA试剂盒使用说明书
人血栓素B2(TXB2)ELISA试剂盒使用说明书
小鼠CD8分子(CD8)ELISA试剂盒使用说明书
大鼠转化生长因于α ELISA试剂盒使用说明书
鸡雌激素(E2)ELISA试剂盒使用说明书
小鼠白细胞介素17(IL-17)ELISA试剂盒使用说明书
猪孕激素(P)ELISA试剂盒使用说明书
猪瘟病毒(CSFV)ELISA试剂盒使用说明书
大鼠孕激素（PROG）ELISA试剂盒使用说明书
人皮质酮（CS）ELISA试剂盒使用说明书
人乳酸脱氢酶（LDH）ELISA试剂盒使用说明书
人可替丁（Cotinine）ELISA试剂盒使用说明书
大鼠血红素氧合酶1（HO-1）ELISA试剂盒使用说明书
人狂犬病毒抗原ELISA试剂盒使用说明书
小鼠钩端螺旋体IgG ELISA试剂盒使用说明书
小鼠白细胞介素35（IL-35）ELISA试剂盒使用说明书
小鼠肝炎病毒（MHV）ELISA试剂盒使用说明书
人瘦素（leptin）ELISA试剂盒使用说明书
人华支睾吸虫抗体ELISA试剂盒使用说明书
人CD40 ELISA试剂盒使用说明书
人肿瘤坏死因子受体相关因子3 ELISA试剂盒说明书
人CD40L ELISA试剂盒使用说明书
人IκB激酶-α（ IKKα）ELISA试剂盒使用说明书
小鼠肾上腺素（E）ELISA试剂盒使用说明书
小鼠生长激素（GH）ELISA试剂盒使用说明书
小鼠三磷酸肌醇（IP3）ELISA试剂盒使用说明书
人视黄醇结合蛋白4（RBP-4）ELISA试剂盒使用说明书
人雌激素受体（ER）ELISA试剂盒使用说明书
兔子肾素（Renin）ELISA试剂盒使用说明书
人抗肝肾微粒体抗体（LKM）ELISA试剂盒使用说明书
人伤寒抗原（St-Ag）ELISA试剂盒使用说明书
小鼠淋巴球性脉络丛脑膜炎病毒抗体ELISA试剂盒说明书
猪辛型肝炎病毒（TTV）ELISA试剂盒使用说明书
小鼠白细胞介素13（IL-13）ELISA试剂盒使用说明书
鱼补体3（C3）ELISA试剂盒使用说明书
人免疫球蛋白G（IgG）ELISA试剂盒使用说明书
犬流感病毒（FLU）ELISA试剂盒使用说明书
大鼠促肾上腺皮质激素（ACTH）ELISA试剂盒说明书
大鼠促肾上皮质激素释放激素ELISA试剂盒说明书
大鼠基质溶素（MAT）ELISA试剂盒使用说明书
人乳头瘤病毒58（HPV-58）ELISA试剂盒使用说明书
人β内酰胺酶（β-lactamase）ELISA试剂盒说明书
小鼠磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶ELISA试剂盒说明书
鸡维生素D（VD）ELISA试剂盒使用说明书
大鼠环氧合酶-2（COX-2）ELISA试剂盒说明书
人去唾液酸糖蛋白受体（ASGPR）ELISA试剂盒说明书
人促性腺激素释放激素（GnRH）ELISA试剂盒使用说明书
人高迁移率族蛋白B1 ELISA试剂盒使用说明书
猪促卵泡素（FSH）ELISA试剂盒使用说明书
人肽聚糖识别蛋白（PGRP-S）ELISA试剂盒使用说明书
人脂联素（ADP）ELISA试剂盒说明书
人血管假血友病因子（vWF）ELISA试剂盒使用说明书
人氧化低密度脂蛋白（ox-LDL）ELISA试剂盒使用说明书
人单核细胞趋化蛋白-1 ELISA试剂盒使用说明书
人热休克蛋白70（HSP-70）ELISA试剂盒
ELISA测定的常用模式四－－间接法测抗体
ELISA测定的常用模式五－竞争法测抗体
ELISA测定的常用模式六固相捕获法测IgM抗体
人S-100 ELISA试剂盒使用说明书
酶联免疫吸附测定ELISA操作中标本的收集
酶联免疫测定技术的多酶级联放大系统
以生物素—亲合素反应为基础的放大系统
酶联免疫测定技术（ELISA）的放大系统
蛋白（及酶）—小分子半抗原结合物的制备
人瘦素（LEP）ELISA试剂盒说明书
人胰岛素原（PI）ELISA试剂盒说明书
人抗流行性出血热（EHFAb）ELISA试剂盒说明书
人S蛋白100B（S-100B）ELISA试剂盒说明书
人肾损伤分子1（Kim-1）ELISA试剂盒说明书
人氧化低密度脂蛋白（OxLDL）ELISA试剂盒说明书
人肿瘤坏死因子α（TNF-α）ELISA试剂盒说明书
人同型半胱氨酸（Hcy）ELISA试剂盒说明书
人晚期氧化蛋白产物（AOPP）ELISA试剂盒说明书
大鼠水通道蛋白2（AQP-2）ELISA试剂盒说明书
大鼠白细胞介素1（IL-1）ELISA试剂盒说明书
大鼠白细胞介素6（IL-6）ELISA试剂盒说明书
大鼠白细胞介素10（IL-10）ELISA试剂盒说明书
猴肿瘤坏死因子（TNF-α）ELISA试剂盒说明书
人凝血酶抗凝血酶复合物（TAT）ELISA试剂盒使用说明书
人抗小反刍兽疫抗体（PPR）ELISA试剂盒说明书
人降钙素原（PCT）ELISA试剂盒说明书
人抑制素B（INH-B）ELISA试剂盒使用说明书
人成纤维细胞生长因子23ELISA试剂盒说明书
人胃蛋白酶原A（PGA）ELISA试剂盒使用说明书
人乙酰胆碱受体抗体（AChRab）ELISA试剂盒说明书
小鼠内皮抑素（ES）ELISA试剂盒说明书
兔乙酰胆碱（ACh）ELISA试剂盒说明书
人血管紧张素Ⅰ受体抗体ELISA试剂盒说明书
人抗缪勒管激素（AMH）ELISA试剂盒说明书
人白细胞介素-10 ELISA试剂盒说明书
大鼠血管活性肠肽ELISA试剂盒说明书
人内皮素1ELISA试剂盒说明书
人血栓调节蛋白ELISA试剂盒说明书
小鼠β淀粉样蛋白1-40 ELISA试剂盒说明书
可溶性细胞间粘附分子1 ELISA试剂盒说明书
人硫酸软骨素酶ELISA试剂盒使用说明书
人嗜环蛋白/亲环素AELISA试剂盒使用说明书
小鼠白介素23ELISA试剂盒使用说明书
人载脂蛋白A4 ELISA试剂盒使用说明书
人晚期糖基化终末产物受体ELISA试剂盒使用说明书
人血小板活化因子ELISA试剂盒使用说明书
人胱天蛋白酶3ELISA试剂盒使用说明书
牛腺病毒ELISA试剂盒使用说明书
人肠三叶因子ELISA试剂盒使用说明书
猪白细胞介素10 ELISA试剂盒使用说明书
小鼠雌二醇ELISA试剂盒使用说明书
小鼠神经生长因子ELISA试剂盒使用说明书
人尿激酶型纤溶酶原激活物受体ELISA试剂盒说明书
猪心肌肌钙蛋白ⅠELISA试剂盒使用说明书
人甘露糖结合蛋白ELISA试剂盒使用说明书
兔核因子κB受体活化因子配基ELISA试剂盒使用说明书
鸡γ干扰素ELISA试剂盒使用说明书
鹅催乳素ELISA试剂盒使用说明书
大鼠谷胱甘肽过氧化酶ELISA试剂盒使用说明书
人布氏菌抗体ELISA试剂盒使用说明书
鸡防御素ELISA试剂盒使用说明书
人蛋白酪氨酸磷酸酶ELISA试剂盒使用说明书
豚鼠免疫球蛋白AELISA试剂盒使用说明书
大鼠促性腺素释放素受体ELISA试剂盒使用说明书
人基质金属蛋白酶-13ELISA试剂盒使用说明书
人糖皮质激素受体α（GR-α）ELISA试剂盒使用说明书
重组腺病毒构建，扩增及纯化基本技术操作
分子生物学实验诊断技术
常用的分子生物学基本技术（二）
医护训练模型,医护培训模型,人体模型,仿真模型
小鼠的饲养与管理
稳定表达细胞株的建立
分子克隆常用技术
转移至硝酸纤维素滤膜前后进行的ＲＮＡ染色

文件名下载
日本三洋SANYO CO2培养箱MC0-18AIC使用说明书 下载
HT201数字高斯计/特斯拉计替代日本进口高斯计TM601 下载
美国Bio-rad伯乐Experion 软件介绍 下载
美国伯乐Experion 全自动电泳工作站官方资料 下载
美国Bio-rad伯乐Bio-Plex系统和悬浮芯片系统使用手册 下载
美国伯乐Powerpac Basic 基础型电源中文使用手册 下载
美国伯乐Powerpac HC 高流电源使用手册 下载
美国Bio-rad伯乐Powerpac HV 高压电源使用手册 下载
美国Bio-rad伯乐Sequi-Gen GT测序电泳槽使用手册 下载
美国伯乐CHEF 基因组DNA插块试剂盒说明书 下载
美国Bio-rad伯乐水平电泳使用手册 下载
美国Bio-rad伯乐水平电泳彩色宣传画 下载
美国Bio-rad伯乐核酸电泳彩色宣传画 下载
美国伯乐785型真空转印仪使用手册 下载
美国Bio-rad伯乐Trans-Blot SD 半干转印槽使用手册 下载

共2页[首页][前页]12 [后页][尾页]

仪表展览网
中国化工仪器网
中国生物器材网
工控机

将变性RNA转移至硝酸纤维素滤膜
将变性RNA转移至硝酸纤维素滤膜

电泳完毕后，可立即将乙醛酰RNA自琼脂糖凝胶转移至硝酸纤维素滤膜，有以下几种转移方法：毛细管洗脱法、真空转移法和电印迹法。毛细管洗脱法如下所述，真空转移法和印迹法则按有关仪器生产厂家产品说明书进行。尽管有人认为在转移前对琼脂糖凝胶进行预处理实属不必（Thomas，1980）甚至有害（Thomas，1983），
但我们认为含甲醛的凝胶必须用经DEPC处理的水淋洗数次，除去甲醛。如果琼脂糖中浓度大于1％或凝胶厚度大于0.5cm或待分析的RNA大于2.5kb，需用0.05mol/L氢氧化纳浸泡凝胶20分钟。然后在凝胶上放置硝酸纤维素凝膜或尼龙膜，RNA随向上迁移的缓冲液转移至固相支持体（硝酸纤维素滤膜或尼龙膜）上。
    1）将凝胶移至一个玻璃皿内，用锋利刀片修凝胶的无用部分，在凝胶左上角（加样孔一端为上）切去一角，以作为下列操作过程中凝胶方位的标记。
    2）用长和宽均大于凝胶的一块Plexiglas有机玻璃或一叠玻璃板作为平台，将其放入大千烤皿内，上面放一张Whatman3MM滤纸，倒入20xSSC使液面略低于平台表面，当平上方的3MM滤纸温透后，用玻棒赶出所有的气泡。
     3）用一把新的解剖刀或切纸刀裁一张硝酸纤维素滤膜（Schleicher＆Schuell BA85或与之相当的产品）。滤膜的长度和宽度应分别比凝胶大1mm，接触滤膜时须戴手套或用平头镊子（例如Millipore镊子），用有油腻的手接触过的硝酸纤维素滤膜不易浸温。
   4）将硝酸纤维素滤膜浮在去离子水表面，直至滤膜从下向上湿透为止，随后用20xSSC浸泡滤膜至少5分钟，用干净的解剖刀片切去滤膜一角，使其与凝胶的切角相对应。不同批号的硝酸纤维膜，其浸湿速率相差悬殊。如滤膜池浮在水面上几分钟后仍未湿透，应另换一张新滤膜，因为未均匀浸湿的滤膜进行RNA转移是靠不住的。这种滤膜也不必丢弃，可将其夹在用2xSSC浸湿的3MM滤纸中间，高压5分钟。通常上述处理足以使硝酸纤维素滤膜湿透。高压处理的滤膜应夹在经过高压理理并用2xSSC浸湿的3MM滤纸中间，装入塑料袋，密封后于4℃保存备用。
    5）将凝胶翻转后置于平台上温润的3MM滤纸中央，3MM滤纸和凝胶这间不能滞留气泡。
    6）用Saran包装膜或Parafilm膜围绕凝胶周边，但不是覆盖凝胶，以此作为屏障，阻止液体自液池直接流至凝胶上方的纸巾层中。并非堆放得十分整齐的纸巾，易于从凝胶的边缘垂下并与平台接触，这种液流的短路是导致凝胶中的RNA的转移效率下降的主要原因。
   7）在凝胶上方放置温润的硝酸纤维素滤膜，并使两者的切角相重叠。滤膜的一条边缘应刚好超过凝胶上部加样孔一线的边缘。滤膜置于凝胶表面适当位置后，就不应轻易移动，滤膜与凝交之间不应留有气泡。
    8）用2xSSC溶液浸湿两张与凝胶同样大小的3MM滤纸，温润的放置在湿润的硝酸纤维滤膜上方。用玻璃棒赶出其间滞留的气泡。
   9）切一叠（5－8cm高）略小于3MM滤纸的纸巾，将其放置在3MM滤纸的上方。并在纸巾上方放一块越境玻璃板，然后用－500g的重物压实。其目的是建立液体自液池经凝胶向硝酸纤维素滤膜的上行流路，以洗脱凝胶中的RNA并使其聚集在硝酸纤维素滤膜上。
   10）使上述RNA转移持续进行6－18小时，每当纸巾浸湿后，应换凝的纸巾。
  11）转移结束后，揭去凝胶上方的纸巾和3MM滤纸，翻转凝胶和硝酸纤维素滤膜，以凝胶的一面在上，置于一张干的3MM滤约纸上，用一支极软铅笔或圆珠笔，在滤膜上标记凝胶加样孔的位置。
   12）从硝酸纤维素滤膜上剥离凝胶弃之。以6xSSC溶液于室温浸泡滤膜5分钟，这一步可以除去粘着在滤膜上的琼脂糖碎片。从6xSSC溶液中取出滤膜，将滤膜上的溶液滴尽后平放在一张纸巾上。于室温晾干30分钟以上。为估计RNA的转移效率，可将胶置于溴化乙锭溶液（0. 5 μg/ml ， 以0.1mol/L乙酸铵配制）中染色45分钟，于紫外灯下观察。
13）将晾干的滤膜放在两经张3MM滤纸中间，用真空炉于80℃干烤0.5-2小时。如干烤时间过长，滤膜极易脆裂并可能发黄。如果滤膜并不立即用于杂交实验，可用铝箔宽松地包裹起来，在真空下贮存于室温。
14）仅适用于滤膜上含有乙醛酰PNA的情况：杂交前需用20mmol/LTris.Cl(pH8.0)于65℃洗膜，除去RNA上的乙二醛分子。
上一篇：核酸序列分析
下一篇：经乙二醛和二甲基亚砜变性处理后进行的RNA电泳

上海普林斯顿生物科技发展有限公司
辽ICP备05022110号-1   网站管理入口
网络推广：仪表展览网   技术支持：
主营产品：酶标仪  伯乐电泳  移液器  奥林巴斯显微镜  细胞株  试剂盒